Pandemic2009H1N1流感病毒HA基因檢測試劑盒
商品屬性:
產品名稱 | 規格 | 貨號 |
盒 | 50T | AP3001 |
【檢測方法】
1 . 試劑準(zhun)備(試劑準(zhun)備區)
將試(shi)劑(ji)盒各組分置 4℃避光融化(hua),充分混勻后(hou)瞬間離心。計算試(shi)劑(ji)使用份數 N(N=樣本數+1 管(guan)(guan)陽(yang)性對照+1 管(guan)(guan)陰性對照),根據下表配置反應體系mix,加入一適(shi)當體積離心管(guan)(guan)中,充分混勻后(hou)瞬間離心,按 20μL 分裝至(zhi) PCR 反應管(guan)(guan)/板,并轉移至(zhi)樣本處理區(qu)。
組分 | 體積(μL ) |
qPCR 預混液(含(han)酶) | 16 |
引物探針 | 4 |
總體積(反應體系 mix ) | 20 |
2 . 樣本(ben)處(chu)理(li)(樣本(ben)處(chu)理(li)區(qu))
① 核酸提取
選(xuan)擇合(he)適的盒提(ti)取核酸(suan),具體按照相(xiang)應的試(shi)劑盒說明書操作。
② 加樣
在已加入反(fan)應體(ti)系(xi) mix 的 PCR 反(fan)應管/板上分別加入處理(li)好的待檢標本核酸、陰性對照、陽性對照各 5μL,終體(ti)積為 25μL。
蓋緊管蓋或封膜,瞬間低(di)速離心(xin)后置熒光 PCR 檢測儀(yi)擴增。
3 . 擴增檢測(ce)(核酸擴增區)
步驟 | 溫度 | 時間 | 循環數 |
①預變性 | 95℃ | 5min | 1cycle |
②變性 退(tui)火/延伸/檢測熒光* | 95℃ 55℃ | 10s 40s | 40cycles |
*
【注意事項】
1.PCR 操作(zuo)各階(jie)段應嚴格分區操作(zuo),避免(mian)交叉污染。
2.試(shi)劑盒各組分使(shi)用(yong)前應充分融化混勻,離心數秒后(hou)使(shi)用(yong)。
3.各組分(fen)不得與其(qi)他產(chan)品或不同(tong)批號的相應(ying)成分(fen)進行互(hu)換(huan)。
4.待測(ce)標本若不(bu)及(ji)時檢測(ce),應保存于-20℃或-70℃。
5.樣品的處理應該嚴(yan)格按照生(sheng)物安全(quan)規范操作。
6.PCR 操作(zuo)人(ren)員應具有經驗和(he)受過專業(ye)培訓。
7.本試劑(ji)盒僅用于科(ke)研使用,不做為(wei)臨床(chuang)診斷使用。
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