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反應(ying)五(wu)要素：
參加PCR反應的物質(zhi)主要有五種即引物、酶、dNTP、模(mo)板(ban)和Mg2
引(yin)(yin)(yin)物(wu)(wu)：引(yin)(yin)(yin)物(wu)(wu)是PCR特異性反應(ying)的關鍵，PCR 產物(wu)(wu)的特異性取決于引(yin)(yin)(yin)物(wu)(wu)與模(mo)板DNA互補的程(cheng)度。理論上，只(zhi)要知道任何一(yi)段(duan)模(mo)板DNA序列(lie)， 就能按(an)其設計互補的寡核苷酸鏈(lian)做引(yin)(yin)(yin)物(wu)(wu)，利用PCR就可將(jiang)模(mo)板DNA在體外(wai)大量擴增。設計引(yin)(yin)(yin)物(wu)(wu)應(ying)遵循(xun)以下原則(ze)：
①引物(wu)長(chang)度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴增跨(kua)度(du)： 以200-500bp為宜(yi)，特定條件下可擴增長(chang)至10kb的(de)片段。
③引(yin)物(wu)堿基(ji)：G C含量以(yi)40-60%為(wei)宜，G C太少擴(kuo)增(zeng)效(xiao)果不佳，G C過多易出現非(fei)特異條帶。ATGC隨機分布，避免5個以(yi)上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列(lie)。
④避免引物(wu)內(nei)部(bu)出現二(er)級(ji)結構，避免兩(liang)條引物(wu)間互(hu)補，特別(bie)是(shi)3'端的(de)互(hu)補，否則會形成引物(wu)二(er)聚體，產(chan)生非特異的(de)擴增(zeng)條帶。
⑤引物3'端的堿(jian)基(ji)，特別是(shi)末及倒數第二(er)個堿(jian)基(ji)，應(ying)嚴(yan)格(ge)要求(qiu)配對(dui)，以避免因末端堿(jian)基(ji)不配對(dui)而導致PCR失(shi)敗(bai)。
⑥引物中有(you)或(huo)能加上合適的酶(mei)(mei)切(qie)位點(dian)， 被擴增的靶序列有(you)適宜的酶(mei)(mei)切(qie)位點(dian)， 這對酶(mei)(mei)切(qie)分析或(huo)分子克(ke)隆很有(you)好處。
⑦引(yin)物(wu)的特異性：引(yin)物(wu)應與核酸序列數據(ju)庫的其它序列無明(ming)顯同源(yuan)性。
引物(wu)量：每條引物(wu)的(de)濃度0.1～1umol或10～100pmol，以低引物(wu)量產生(sheng)所需(xu)要的(de)結果為好(hao)，引物(wu)濃度偏高(gao)會(hui)引起(qi)錯配和非特異性擴增，且(qie)可增加引物(wu)之(zhi)間(jian)形(xing)成二(er)聚體(ti)的(de)機會(hui)。

特點：
高(gao)特異(yi)性：與(yu)其他病毒無交叉反應，無非特異(yi)性擴增；
高(gao)靈敏(min)度：檢測靈敏(min)度可達10~100；
操作(zuo)簡便：該(gai)系列所有試(shi)劑均采用相同的體系和條件，可(ke)同時進行多個檢測；
高(gao)通量：多種(zhong)雙(shuang)重PCR檢測以(yi)及(ji)三重PCR檢測試(shi)劑盒。

樣品 DNA 的(de)制備(bei)：
1.用(yong)自選方(fang)法純(chun)化(hua)樣品的(de) DNA，本(ben)(ben)試劑盒跟市場(chang)上大多數病毒 DNA 提取(qu)試劑盒兼(jian) 容(rong)。。也可以選購本(ben)(ben)公司的(de)一管(guan)式(shi)病毒 DNAout 或其升級(ji)版柱式(shi)病毒 DNAout。 本(ben)(ben)試劑盒免費贈送 15 次 DNA 病毒裂(lie)解(jie)液試用(yong)裝(zhuang)（一管(guan)式(shi)病毒 DNAout 的(de)成分(fen)）。
稀(xi)釋(shi)陽性(xing)(xing)對(dui)照（以 10E2-10E7 這 6 個(ge) 10 倍稀(xi)釋(shi)度為例。由于標(biao)準品(pin)濃度非常高，因此(ci)下列稀(xi)釋(shi)操作一定要在獨立的(de)區域進行(xing)，千(qian)萬不(bu)能污(wu)染樣(yang)品(pin)或本試劑盒的(de)其他成分）。為增加(jia)產(chan)品(pin)穩定性(xing)(xing)和(he)避免擴散傳(chuan)染性(xing)(xing)病原(yuan)，本產(chan)品(pin)不(bu)提供活(huo)體(ti)樣(yang)品(pin)做陽性(xing)(xing)對(dui)照，只提供可以直接使(shi)用的(de)長為 86bp 的(de) DNA 片段作為陽性(xing)(xing)對(dui)照。
2.標記(ji) 6 個離心管，分(fen)別(bie)為 7，6，5，4，3，2。
3.用(yong)帶芯槍頭分別加入 45 μL 模(mo)板(ban)稀釋(shi)液（用(yong)帶芯槍頭，下同）。
4.在(zai) 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝(bei)/μL 的(de)(de)陽(yang)性對(dui)(dui)照，充(chong)分(fen)(fen)震(zhen)蕩(dang) 1 分(fen)(fen)鐘(zhong)，得1×10E7 拷貝(bei)/μL 的(de)(de)陽(yang)性對(dui)(dui)照。放冰上(shang)(shang)待用。5.換槍頭(tou)，在(zai) 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝(bei)/μL 的(de)(de)陽(yang)性對(dui)(dui)照(上(shang)(shang)步稀釋所得)，充(chong)分(fen)(fen)震(zhen)蕩(dang) 1 分(fen)(fen)鐘(zhong)，得 1×10E6 拷貝(bei)/μL 的(de)(de)陽(yang)性對(dui)(dui)照。放冰上(shang)(shang)待用。
6.換槍頭(tou)，在 5 號管中(zhong)加入(ru) 5 μL 1×10E6 拷貝(bei)/μL 的陽(yang)(yang)性(xing)對照到(dao) 5 號管中(zhong)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝(bei)/μL 的陽(yang)(yang)性(xing)對照。放(fang)冰上待用。
7.換(huan)槍頭，在(zai) 4 號(hao)管中加 5 μL 1×10E5 拷貝(bei)/μL 的(de)陽(yang)(yang)性(xing)對照(zhao)到 4 號(hao)管中，得(de)1×10E4 拷貝(bei)/μL 的(de)陽(yang)(yang)性(xing)對照(zhao)。放冰(bing)上待(dai)用。8.重復上面的(de)操(cao)作直到得(de)到 6 個稀釋度的(de)陽(yang)(yang)性(xing)對照(zhao)。放冰(bing)上待(dai)用。
?
使用及(ji)效果：
PCR反應(ying)特(te)點
(1) 特異性強
PCR反應(ying)的(de)特異(yi)性決定(ding)因素為(wei)：
①引物與模板DNA特異(yi)正確的結合(he)；
②堿基(ji)配對(dui)原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠(zhong)實性(xing)；
④靶基因的特(te)異性與保守性。
其中引(yin)(yin)物與模板(ban)的(de)(de)正(zheng)確結合(he)(he)是(shi)關(guan)鍵。引(yin)(yin)物與模板(ban)的(de)(de)結合(he)(he)及(ji)(ji)引(yin)(yin)物鏈(lian)的(de)(de)延(yan)伸是(shi)遵循(xun)堿基(ji)配對原則的(de)(de)。聚合(he)(he)酶(mei)合(he)(he)成反應的(de)(de)忠實性及(ji)(ji)Taq DNA聚合(he)(he)酶(mei)耐高(gao)溫(wen)性，使(shi)反應中模板(ban)與引(yin)(yin)物的(de)(de)結合(he)(he)(復性)可以在較高(gao)的(de)(de)溫(wen)度(du)下(xia)進行，結合(he)(he)的(de)(de)特(te)異(yi)(yi)性大(da)大(da)增(zeng)加，被(bei)擴增(zeng)的(de)(de)靶基(ji)因(yin)(yin)片段也就(jiu)能保(bao)持很高(gao)的(de)(de)正(zheng)確度(du)。再(zai)通過選(xuan)擇特(te)異(yi)(yi)性和保(bao)守性高(gao)的(de)(de)靶基(ji)因(yin)(yin)區，其特(te)異(yi)(yi)性程度(du)就(jiu)更高(gao)。
(2) 靈(ling)敏度高
PCR產(chan)物的(de)生成量是以指數方(fang)式增(zeng)加(jia)的(de)，能將皮克(ke)(pg=10-12g)量級(ji)的(de)起始待測(ce)模板擴增(zeng)到微克(ke)(ug=10-6g)水平。能從100萬個(ge)細胞(bao)中(zhong)檢(jian)(jian)出一個(ge)靶細胞(bao)；在(zai)病(bing)毒的(de)檢(jian)(jian)測(ce)中(zhong)，PCR的(de)靈敏度可達3個(ge)RFU(空斑形(xing)成單(dan)位(wei))；在(zai)細菌學中(zhong)zui小檢(jian)(jian)出率為3個(ge)細菌。
(3) 簡(jian)便、快速
PCR反應(ying)用耐高溫的Taq DNA聚(ju)合酶，一次性地將反應(ying)液(ye)加好(hao)后，即在DNA擴(kuo)增(zeng)(zeng)液(ye)和水(shui)浴鍋(guo)上(shang)進行變(bian)性-退火-延(yan)伸反應(ying)，一般在2～4 小時完成(cheng)擴(kuo)增(zeng)(zeng)反應(ying)。擴(kuo)增(zeng)(zeng)產(chan)物一般用電泳分析，不一定要用同位(wei)素，無放(fang)射性污染、易推廣。
(4) 對(dui)標本的純度要求低(di)
不需要(yao)分離病毒或細菌(jun)及(ji)培養細胞(bao)，DNA 粗制品及(ji)總RNA均(jun)可作為(wei)擴增模板。可直接用臨床標(biao)本如血液、體腔(qiang)液、洗嗽液、毛發(fa)、細胞(bao)、活PCR技(ji)術(shu)概(gai)論。

P3單克隆抗體 英文名：Anti-XPNPEP3 mouse monoclonal antiboy 冷凍（-20℃） 避光
小鼠抗ATG3單克隆抗體 英文名：Anti-ATG3 mouse monoclonal antiboy 冷凍（-20℃） 避光
小鼠抗NEK9單克隆抗體 英文名：Anti-NEK9 mouse monoclonal antiboy 冷凍（-20℃） 避光
小鼠抗SET7單克隆抗體 英文名：Anti-SET7 mouse monoclonal antiboy 冷凍（-20℃） 避光
小鼠抗KIF2C單克隆抗體 英文名：Anti-KIF2C mouse monoclonal antiboy 冷凍（-20℃） 避光
小鼠抗HSPBP1單克隆抗體 英文名：Anti-HSPBP1 mouse monoclonal antiboy 冷凍（-20℃） 避光
小鼠抗PTPN1單克隆抗體 英文名：Anti-PTPN1 mouse monoclonal antiboy 冷凍（-20℃） 避光
小鼠抗SSR1單克隆抗體 英文名：Anti-SSR1 mouse monoclonal antiboy 冷凍（-20℃） 避光
筋骨草甾酮C Ajugasterone C 23044-80-6 10mg 
去氫毛鉤藤堿 Hirsuteine 35467-43-7 5mg 
前杯莧甾酮 Precyasterone 27335-85-9 10mg 
假人參皂苷RT1  Pseudoginsenoside RT1 98474-74-9 10mg 
2''-O-p-反式香豆酰基葒草苷 Orientin 2’’O-p-trans-coumarate 73815-15-3 5mg 
2''-O-p-香豆酰基牡荊素  Vitexin 2’’-O-p-coumarate 59282-55-2 5mg 
日當藥黃素  Swertiajaponin 6980-25-2 10mg 
商陸皂苷辛 Esculentoside H 66656-92-6 20mg
商陸皂苷T Esculentoside T  20mg 
4'-O-甲基補骨脂查耳酮B 4'-O-Methylbroussochalcone B 20784-60-5 10mg 
(7S,7'R)-雙(3,4-亞甲二氧苯基)-rel-(8R,8'R)-二甲基四氫呋喃  rel-(8R,8'R)-dimethyl-(7S,7'R)-bis(3,4-methylenedioxyphenyl)tetrahydro-furan 178740-32-4 10mg 
異補骨脂色烯查耳酮 4-Hydroxylonchocarpin 56083-03-5 10mg 
番瀉苷A標準品 英文名稱Sennoside A 規格 ：20mg CAS:81-27-6 進口、國產
番瀉苷B標準品 英文名稱Sennoside B 規格 ：20mg CAS:128-57-4 進口、國產
芝麻油標準品 英文名稱Sesame Oil (AS) 規格 ：1ml×2ampules CAS:8008-74-0 進口、國產
芝麻油相關物質B標準品 英文名稱 規格 ：6mg×3vials CAS:64550-34-1 進口、國產
芝麻油相關物質A標準品 英文名稱 規格 ：6mg×3vials CAS:2190-21-8 進口、國產
L-絲氨酸標準品 英文名稱L-Serine 規格 ：200mg CAS:56-45-1 進口、國產
鹽酸舍曲林外消旋混合物標準品 英文名稱 規格 ：25mg CAS:79617-89-3 進口、國產
鹽酸舍曲林相關物質A標準品 英文名稱 規格 ：25mg CAS: 進口、國產
鹽酸舍曲林標準品 英文名稱Sertraline Hydrochloride 規格 ：100mg CAS:79559-97-0 進口、國產
兔抗GPR1多克隆抗體 英文名：Anti-GPR1 rabbit polyclonal antiboy 冷凍（-20℃） 避光
兔抗PRLHR多克隆抗體 英文名：Anti-PRLHR rabbit polyclonal antiboy 冷凍（-20℃） 避光
兔抗P2RY14多克隆抗體 英文名：Anti-P2RY14 rabbit polyclonal antiboy 冷凍（-20℃） 避光
兔(tu)抗GPR119多克隆(long)抗體(ti) 英文名：Anti-GPR119 rabbit polyclonal antiboy 冷凍（-20℃） 避光